Avtor/Urednik		Kuret, Jošt
Naslov		Ohranitev ultrastructure biološkega materiala s kriofiksacijo in kriodehidracijo
Prevedeni naslov		Preservation of biological material with cryofixation and cryodehydration
Tip		članek
Vir		Zdrav Vestn
Vol. in št.		Letnik 64, št. Suppl 3
Leto izdaje		1995
Obseg		str. III-29-33
Jezik		slo
Abstrakt		Background. Classical approach of preparation of biological specimens produces different artefacts in the final image of the cell. As an alternative, cryofixation and freeze substitution are taking places in laboratories for electron microscopy. The advantage of these methods is quick immobilization of samples, no chemical reactions that could alter the specimen and better preserved morphology and antigenicity. Methods. The aim of our work was to test and introduce the optimal combination of cryofixation and cryodehydration into our laboratory. We tested and compared three methods, Flat Embedding, Progressive Lowering of Temperature (PLT) and Cryofixation combined with Freeze Substitution. Results. The best preservation of ultrastructure was achieved with cryo methods. Flat embedding turned out to be inferior to cryomethods, while the PLT method produced poorly preserved cells. Conclusions. Our decision to introduce the combination of fixation in liquid propane and freeze substitution was based on the results we achieved with these methods.
Izvleček		Izhodišča. Zaradi številnih nezaželjenih sprememb, ki spremljajo klasične metode obdelave biološkega materiala za elektronsko mikroskopijo, se v zadnjih letih kot alternativna možnost uveljavljajo metode kriofiksacije biološkega materiala, povezane z dehidracijo pri nizki temperaturi. Prednost teh metod je v trenutni imobilizaciji vzorca, brez kemičnih reakcij, ki bi spremenile vzorec, s tem pa sta bolje ohranjeni morfologija in antigenost biološkega materiala. Metode. Namen našega dela je bil preizkusiti ter nato izbrati in uvesti v naš laboratorij najustreznejše kriometode, s katerimi bomo v prihodnosti nadomestili klasično, t.j. kemično obdelavo bioloških vzorcev na sobni temperaturi. Preizkusili in primerjali smo tri metode in sicer metodo ploskega vlaganja, metodo postopnega zniževanja temperature in metodo kriofiksacije in kriodehidracije. Rezultati. Ultrastruktura celice je bila najbolje ohranjena pri vzorcih, ki so bili obdelani s krio metodami z metodo ploskega vlaganja smo dobili slabše ohranjeno strukturo celice, medtem ko so bili vzorci, dobljeni po metodi postopnega zniževanja temperature, slabo ohranjeni. Zaključek. Na podlagi dobljenih rezultatov smo se odločili, da bomo pri nadaljnjem delu uporabljali kombinacijo fiksacije v tekočem propanu in dehidracije pri nizki temperaturi (Freeze Substitution).
Deskriptorji		CRYOPRESERVATION MICROSCOPY, ELECTRON CELL LINE FREEZE DRYING MEASLES VIRUS