Author/Editor     Podgornik, Helena; Pajič, Tadej; Kokalj-Vokač, Nadja; Zagorac, Andreja; Rupreht, Ruth; Černelč, Peter
Title     Citogenetične in molekularnogenetične preiskave pri ugotavljanju kronične mieloične levkemije in spremljanju zdravljenja
Translated title     The role of cytogenetics and molecular genetics in diagnosis of chronic myeloid leukemia and monitoring of treatment response
Type     članek
Source     Zdrav Vestn
Vol. and No.     Letnik 73, št. Suppl 1
Publication year     2004
Volume     str. I-13-7
Language     slo
Abstract     Background. Chronic myeloid leukemia serves as a model for the disease where the knowledge as well as the development of different new methods from molecular biology were successfully introduced into the clinical practice. Methods. Standard cytogenetic analysis was primarily used for detecting the translocation between chromosomes 9 and 22: t(9;22) while fluorescence in situ hybridization (FISH) and real time PCR (Q-RT-PCR) were mainly emplayed for monitoring of the disease. We evaluated the results of both molecular diagnostic methods. During the past few years the work has been done in the laboratory of the Department for haematology in Ljubljana and Laboratory for Medical Genetics in Maribor. Results. A good correlation of results obtained by both methods was confirmed for the period of time before the complete cytogenetic remission. We also established an initial BCR-ABL/ABL ratio of 0.94 which is a basis for later determination of a major molecular remission which as defined as >= 3 log reduction in BCR-ABL/ABL. Conclusions. Standard cytogenetic analysis of bone marrow cells is the basic diagnostic approach in haematologic malignancies. At the same time FISH and PCR can also be used for confirmation of recurrent chromosomal abnormalities. FISH is the most appropriate method for CML monitoring during the first period of therapy. When cytogenetic remission is achieved, Q-RT-PCR is a method of choice. In acute leukaemia PCR is mainly used in remission for the detection of malignant clone. If the clone can not be detected even by nested RT-PCR, prognosis of the disease is rather good.
Summary     Izhodišča. Kronična mieloična levkemija (KML) je značilen primer klonske mieloproliferativne bolezni, pri kateri se citogenetična in molekularnogenetična znanja in na njih temelječe preiskave uporabljajo za natančno potrditev bolezni, za učinkovito spremljanje zmanjševanja bolezenskega klona celic med zdravljenjem, za spremljanje morebitne ponovitve bolezni in minimalnega preostanka bolezni. Metode. Za potrditev bolezni določamo translokacijo t(9;22) s standardno citogenetično preiskavo, uspešnost zdravljenja pa spremdjamo z dvema molekularnogenetičnima preiskavama, fluorescenčno in situ hibridizacijo (FISH) ter verižno reakcijo spolimerazo v realnem času (Q-RT-PCR). Pregledali smo izsledke teh preiskav, ki smo jih opravili pri 40 bolnikih na Kliničnem oddelku za hematologijo v Ljubljani in Laboratoriju za medicinsko genetiko v Mariboru v zadnjih štirih letih. Rezultati. Za spremljanje KML v prvem obdobju do stabilne citogenetične remisije smo prisotnost kromosoma Philadelphia potrjevali s preiskavo FISH. Po približno letu in pol je Ph(+) celic praviloma manj kot 5-10%, zato smo bolezen začeli spremljati s preiskavo Q-RT-PCR, nadaljevali pa smo tudi s preiskavo FISH. Ugotovili smo dobro ujemanje obeh metod pred popolno citogenetsko remisijo. Izračunali smo tudi izhodiščno vrednost razmerja prepisov BCR-ABL/ABL (0,94) in na njeni osnovi določili delež bolnikov, ki so dosegli dobro molekularno remisijo. Zaključki. Temeljna preiskava pri diagnosticiranju hematoloških novotvorb je standardna citogenetična preiskava kostnega mozga. Za ciljno potrjevanje pričakovanih kromosomskih nepravilnosti ob odkritju bolezni lahko vzporedno izvajamo tudi preiskavi FISH ter PCR. Pri bolnikih z akutno levkemijo je v obdobju remisije raven rakastih celic tako majhna, da je večinoma najustreznejša preiskava PCR. Če z njo ne zaznamo prisotnosti rakastega klona, lahko zanesljivo napovemo ugoden potek bolezni.
Descriptors     LEUKEMIA, MYELOID, CHRONIC
CYTOGENETICS
POLYMERASE CHAIN REACTION
IN SITU HYBRIDIZATION, FLUORESCENCE
CHROMOSOME ABERRATIONS
NEOPLASM, RESIDUAL