Author/Editor		Potrich, Cristina; Viero, Gabriella; Tejuca, Mayra; Anderluh, Gregor; Maček, Peter; Menestrina, Gianfranco
Title		Construction of new immunotoxins by linking equinatoxin II to monoclonal antibodies via the biotin-avidin interaction. Cytotoxic effects on human tumor cells
Translated title		Citotoksični efekti immunotoksinov sestavljenih iz equinatoxina II in monoklonskih protiteles na človeške tumorske celice
Type		članek
Source		Acta Biol Slov
Vol. and No.		Letnik 43, št. 1-2
Publication year		2000
Volume		str. 47-51
Language		eng
Abstract		The pore-forming protein equinatoxin II (EqtII) from Actinia equina, and five single cysteine EqtII mutants (K20C, K77C, R126C, R144C, A179C), were evaluated for the preparation of specific immunotoxins (IT). They were linked to a monoclonal antibody (mAb) specific for tumor cells via the high affinity avidin-biotin interaction. Three human tumor cell lines (malignant melanoma, breast adenocarcinoma, and ovary adenocarcinoma) and one control line (chinese hamster ovary cells) were tested. The ITs displayed some specific activity when mAbs directed against tumor antigens were used. However, unspecific activity remained high, being still around 30% of the specific activity in the best case.
Summary		Imunotoksini (IT) so kimerne molekule, ki jih lahko uspešno uporabimo pri selektivnem uničevanju telesu nezaželenih celic (npr, tumorskih ali parazitskih). Sestavljeni so iz dveh delov. Del, ki se veže na komponente celične membrane je monoklonalno protitelo ali v nekaterih primerih rastni faktor. Toksinski del je lahko ali toksin, ki deluje znotraj celice, npr. inhibira proteinsko sintezo, ali deluje na celično membrano. Čeprav so v zadnjih letih uporabljali predvsem toksine prvega tipa (A-B toksini), so bili citolizini prav tako uspešno preizkušeni pri selektivnem uničevanju tumorskih ali parazitskih celic. Prednost je, da delujejo direktno na celično membrano in ne potrebujejo endocitotskega privzema v celico (kot npr. A-B toksini). Ekvinatoksin II (EqtII) je zelo aktiven citolizin iz morske vetrnice Actinia equina. Heterologna ekspresija v E. coli je omogočala pripravo različnih mutant, ki pomagajo razvozlati mehanizem tvorbe pore, uporabne pa so lahko tudi pri pripravi specifičnih IT. V tem prispevku smo EqtII in pet cisteinskih mutant (K20C, K77C, K126C, R144C, A179C) uporabili pri pripravi IT. Toksine smo povezali z monoklonskim protitelesom, specifičnim za receptorje na površini tumorskih celic, preko visoko afinitetne povečave avidin-biotin. Aktivnost tako pripravljenih IT smo testirali na treh človeških tumorskih celičnih linijah (maligni melanom, adenokarcinom dojke in adenokarcinom jajčnikov) in eni kontrolni celični liniji (hrčkove jajčne celice). IT so specifično aktivni proti turmoskim celičnim linijam, vendar je nespecifična aktivnost še vedno zelo visoka, v najboljšem primeru 30% specifične.
Descriptors		TUMOR CELLS, CULTURED IMMUNOTOXINS CNIDARIAN VENOMS ANTIBODIES, MONOCLONAL AVIDIN BIOTIN